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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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雞敗血支原體PCR檢測試劑盒說明書
  • 品牌:帛科
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:BKP4050
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-12
  • 更新日期: 2025-04-30
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 帛科
貨號 BKP4050
用途 公司產品僅用物科研
包裝規格 50次
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93預變性3-5min,進入循環擴增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環30-35次,在72 7min。
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產品名稱

英文名稱

貨號

雞敗血支原體PCR檢測試劑盒說明書

Mycoplasma galliscepticumPCR

BKP4050

技術服務內容:

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢:
1. 特異性:雞敗血支原體PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%
 2.   
重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3.   
靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5.   
優勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

C2C12(小鼠成肌細胞) 5×106cells/瓶×2氮藍四唑,英文名或英文縮寫:NBT,級別:CP98%,規格:20微克

CN1 Others Human CN1 / Coactin-1 人細胞裂解液 (陽性對照) (3S)-(-)-1-(叔丁氧羰基)-3-安基 (S)-(-)-1-tqrt-Butoxyccrbonyl-3-cminopyrrolidinq 147081-44-2

大鼠雪旺細胞RSCL-叔亮安醋 L-tqrt-Lqucinq 0829-0-3

TSPAN8 Others Human TSPAN8 / Teaspanin 8 / TM4SF3 人細胞裂解液 (陽性對照) 聚硅氧烷,英文名或英文縮寫:Silicone,級別:基準試劑,99%,規格:250毫升

獼猴皮膚細胞;MMS77226-23-5N,N-二甲基基脲1,3-Dimetxyl-3,4,5,6-tetraxy7no-2(1H)-pyrimidinone
CSNK2A2 Others Human
CSNK2A2 / CK2A2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 咽側體抑制素ⅣAllatostatin IV質量規格:>95%,BR

骨骼肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)糊精肽,人Amylin,human質量規格:>95%,BR

人間充質干細胞- 人肌肉成纖維細胞瘤,C2C12細胞 B16(色素瘤細胞)緊張素AAngiotensin A質量規格:>95%,BR

人小細胞細胞;NCI-H446緊張素轉換酶抑制劑Angiotensin ConvertingEnzyme Inhibitor質量規格:>95%,BR

CD48 Others Mouse 小鼠 CD48 / BCM1 / SLAMF2 人細胞裂解液 (陽性對照) 緊張素原(1-14),大鼠Angiotensinogen (1-14) ,Rat質量規格:>95%,BR
雞敗血支原體PCR檢測試劑盒說明書TGFBR3 Others Mouse 小鼠 TGFBR3 / Betaglycan 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,3-(六氟-α-羥基異丙基)(>98.0%(GC))1,3-Bis(hexafluoro-α-hydroxyisopropyl)benzene質量規格:>98.0%(GC)

NCI-H446 人小細胞細胞β-NADH;還原性輔酶I二鈉鹽β-NADH.hydrate質量規格:>90%,羅氏分包

hDPSCs, 人前牙髓干細胞蘇拉明鈉Suramin 質量規格:>98%,BR

人臍動脈平滑肌細胞彈性蛋白酶Elastase, pancreatic from porcine pancreas質量規格:30 units/mg

人正常上皮細胞;MCF 10A 人胰腺星狀細胞完全培養基 100mL脂肪酶Lipase質量規格:20000U/g,BR
CD200 Others Cynomolgus
食蟹猴 CD200 人細胞裂解液 (陽性對照) TEMED四甲基乙二安蛋白組學級透明液體RTsigma

615小鼠滑膜瘤株;ZM7553-安基本硼醋言醋鹽 3-cMINOPHqNYLBORONIC cCID xy7noCHLORIDq 82006-3-1

LTEP-s細胞,人肺鱗癌細胞 小鼠皮膚細胞,JB6-C30細胞 CL-0114Hs 578T(人癌細胞)5×106cells/瓶×2DNASEI脫氧核糖核酸酶 (DNase I)超級白色至米白色結晶粉末FROZENsigma

Tca-8113(人舌鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2AGAROSERA常規分析用瓊脂糖生物技術級白色精細粉末RTsigma

HBdMEC-c 人膀胱微內皮細胞(HBdMEC) 500,000cells 皮下脂肪細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)12069-32-8碳化硼Boron carbide;Tetraboron carbide
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。


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